Микрохимический анализ

Гистохимические реакции дают дополнительные сведения для установления подлинности лекарственного растительного сырья. Кроме того, они часто позволяют обнаружить вещества непосредственно в тканях и клетках, таким образом дают возможность определить их локализацию в тканях растения, что имеет важное значение при решении многих практических вопросов использования растительного сырья.

Гистохимические реакции позволяют обнаруживать вещества в ничтожно малых количествах, что обусловливает необходимость большой пунктуальности и чистоты в работе. Непременным условием гистохимической реакции является ее специфичность, поэтому при наличии в исследуемом объекте других веществ, дающих такие же результаты реакции, их необходимо предварительно удалить. Нередко пользуются контрольными опытами, которые проводят с объектом, освобожденным различными обработками от исследуемого вещества.

Микроскопы

Микроскопы позволяют получать увеличенное изображение мелких объектов и совершенно необходимы для изучения анатомического строения растений. Микроскопы бывают двух видов: визуальные (изображение рассматривается непосредственно в микроскоп) и проекционные (изображение проектируется на экран). Первые находят более широкое применение.

Микроскоп состоит из трех основных частей: оптических приборов, осветительной системы и штатива. К оптическим приборам микроскопа относятся объективы и окуляры, которые участвуют в Построении изображения и обеспечивают необходимое увеличение предмета; разрешающая способность микроскопа зависит исключительно от объектива; окуляр служит лишь для дальнейшего увеличения полученного изображения.

Правила пользования

Микроскоп необходимо тщательно оберегать от пыли, поэтому хранить его следует в футляре или под стеклянным (или другим непроницаемым для пыли) колпаком. Перед началом работы микроскоп вынимают из футляра (при этом его берут за изогнутую часть штатива, держа в вертикальном положении) и осторожно ставят на рабочее место. Затем налаживают освещение препарата.

Плоское зеркало используют при работе с объективами, требующими применения конденсора; в остальных случаях лучше применять вогнутое зеркало. Искать источник света надо с объективом слабого увеличения или совсем без объектива. Слишком яркого освещения следует избегать, так как оно может ослепить глаз и на некоторое время лишить его чувствительности. Интенсивность освещения можно ослабить с помощью матового стекла, которое накладывают на кольцо под конденсором. Следует приучить себя, смотря в окуляр одним глазом, другой оставлять открытым. В противном случае глаза быстро устают. Удобнее смотреть левым глазом, а тетрадь для рисования помещать с правой стороны.

Исследование препарата начинают со слабого увеличения. Только основательно изучив общий вид препарата, можно переходить к сильному увеличению. Для этого, поместив в центр поля зрения деталь, которую хотят рассмотреть при сильном увеличении, поворотом револьвера сменяют объектив. Объективы в микроскопе (кроме иммерсионного) подогнаны так, что при переходе от одного к другому механизмом грубой фокусировки пользоваться не приходится.

Изучая препарат при большом увеличении, правую руку следует все время держать на рукоятке микрометрического винта, чтобы фокусировать необходимую часть поля зрения. Во время работы надо следить за чистотой объективов, не допускать попадания жидкости на линзу объектива. Окончив изучение препарата, необходимо поднять тубус на значительное расстояние, и только после этого снять препарат со столика.

Лупу чаще используют при макроскопическом анализе лекарственного растительного сырья, когда надо определить наличие и характер опушенности, наличие эфирномасличных железок и т. п., а также при исследовании мелких объектов - семян, цветков, плодов зонтичных и т. д. Лупа состоит из одной простой или сложной положительной (увеличивающей) линзы. Рассматриваемый предмет должен находиться в передней фокальной плоскости или несколько ближе.

Микрометры

Для измерения различных деталей препарата под микроскопом (кристаллов, крахмальных зерен, волосков, железок, пыльцы и т. п.) служит окулярный микрометр, который предварительно должен быть калиброван при помощи объективного микрометра.

Рисовальный аппарат

Прибор служит для зарисовки изображения, получаемого с помощью микроскопа. Основные части рисовального прибора — светоделительная призма-кубик и плоское зеркало. Светоделительная призма позволяет одновременно видеть объект под микроскопом и экран, т. е. лист бумаги, на котором производят зарисовку.

Бритва

При микроскопическом исследовании лекарственного растительного сырья (корней, корневищ, клубней, плодов, семян, а в некоторых случаях и листьев) возникает необходимость в приготовлении срезов. Чаще всего срезы готовят с помощью бритвы, иногда для этой цели пользуются микротомом.

Биологическая стандартизация — испытание действия лекарственных веществ в опытах на животных, т. е. биологическим путем. Этот метод определения качества лекарственных препаратов применяется в тех случаях, когда химические или другие методы анализа непригодны. Биологическая активность сырья или препарата устанавливается путем сравнения со стандартом. Например, для определения биологической активности листьев и препаратов наперстянки пурпуровой и крупноцветной служат специально приготовленные экстракты из этих растений, содержащие сумму гликозидов и очищенные от балластных веществ. Стандарты изготовляются и выпускаются специализированными научно-исследовательскими институтами. Активность определяется на лягушках, кошках, голубях. Выражается она в биологических единицах действия (ЕД). Для некоторых препаратов установлены международные стандарты и международные единицы действия (ME).

В Государственной фармакопее СССР приводятся подробные описания стандартов и методов биологической стандартизации для лекарственных растений и препаратов, содержащих сердечные гликозиды, некоторых гормональных препаратов, антибиотиков, новарсенола и миарсенола.