Тонка я структура гена.
Дж. Бидд и Е. Тэйтум сформу лировали принцип «один ген — один фермент», означавший, что каждый ген контролирует синтез какого-либо фермента. С. Бензера, работал с мутациями в локусе rII бактериофага Т4 Е. coli. Особенность этих мутантов состоит также в том, что они вообще не могут размножаться в клетках штамма Е. coli К12, лизогенного по фагу λ. Эти взаимоотношения мутантов rII со штаммами Е. со li создают возможность: 1) выращивать только ревертанты и рекомбинанты r+ на штамме Е. со li К 12 (λ); 2) одновременно исследовать мутанты rII и фаги дикого типа — г+ на штамме Е. coli В. При заражении бактериальной клетки двумя фаговыми частицами между их геномами возникают функциональные отношения, аналогичные отношениям между гомологичными хромосомами диплоида . При этом обнаруживается доминирование признаков нормального фага, выражающегося в образовании мелких стерильных пятен как на штамме В, так и на штамме К12 (Л). Таким образом, между различными мутациями rII возможен функциональный тест на аллелизм. На основе функционального теста на аллелизм выяснилось, что локус rII включает два гена: А и В. В ходе репликации фаговых геномов после инфекции бактериального штамма двумя мутантами rII могут образовываться рекомбинанты дикого типа. Частота появления этих рекомбинантов пропорциональна расстоянию между мутантными точками в геноме бактериофага. При попарном исследовании способности к рекомбинации трех различных мутантов rII получаемые значения частот рекомбинации могут быть использованы для линейного расположения мутаций на основе принципа аддитивности. Общее количество необходимых скрещиваний удалось резко сократить благодаря методу перекрывающихся делеций. Стабильные мутанты не могли образовывать рекомбинантов при скрещивании с несколькими мутантами, рекомбинировавшими друг с другом. С. Бензер решил, что такие «стабильные» мутанты возникли в результате выпадения целых участков локуса rII. Использование делеций при картировании позволяет заменить количественный учет частоты рекомбинации качественным тестом. При скрещивании точкового и делеционного мутантов рекомбинанты могут появиться, только если делеция не перекрывает участок, в котором локализована точковая мутация. Взаимное положение мутаций, оказавшихся в одном сегменте, определяли попарными скрещиваниями. В локусе rII удалось выявить 308 мутационных точек, или сайтов, расположенных в линейной последовательности. На карте ген А занимает участок примерно в 2 раза больше, чем ген В. Отдельные точки локуса rII обладают различной мутабильностью. Наиболее мутабильные из них получили наименование горячих точек. При индуцированном мутагенезе в локусе rII горячие точки распределяются характерно для каждого использованного мутагена, отлично от распределения, характерного для спонтанного мутирования. Была сопоставлена размерность генетической карты бактериофага (частоты рекомбинации) с размерностью молекулярных структур, ответственных за хранение и передачу наследственной информации, т. е. с числом нуклеотидных пар молекулы ДНК. Минимальная частота рекомбинации составляла 0,02 %. С минимальной частотой рекомбинация происходила на расстоянии около двух нуклеотидных пар. Рекомбинация может разделять соседние пары нуклеотидов, наименьший участок ДНК, который изменяется при мутировании, — это пара нуклеотидов. Для отнесения двух мутаций к одной или разным единицам функции использовали так называемый цис-транс-тест, изобретенный Е. Льюисом. Согласно этому тесту мутации попарно испытывают в гетерозиготе в двух конфигурациях: цис — когда обе мутации в гибриде происходят от одного родителя, и транс — когда они поступают в гибрид от разных родителей. Если цис- и транс-гетерозигота имеют одинаковый (дикий) фенотип, то мутации затрагивают разные единицы функций, а если цис- и транс-гетерозиготы разного фенотипа (цис — дикий, а транс — мутантный), то мутации затрагивают одну единицу функции, которую он предложил называть цистроном. Для рецессивных мутаций цис-транс-тест сводится к функциональному тесту на аллелизм Т. X. Моргана и таким образом понятия цистрон и ген как единица функции совпадают. Достижением в работе С. Бензера была разработка метода перекрывающихся делеций для внутригенного картирования, благодаря которому стало возможным «насыщать» генетическую карту мутациями. Он впервые перевел величины, измеряемые в генетическом анализе, в молекулярную размерность: сопоставил их с мономерами молекулы ДНК. Итогом этой работы было разрешение кажущихся противоречий между критериями аллелизма. Стала очевидной их относительность, особенно в отношении рекомбинационного критерия аллелизма. Функциональный же критерий аллелизма сохраняет свою ценность с учетом возможности межаллельной комплементации. Бензер ввел: цистрон – единица ф-ции, рекон – единица рекомбинации, мутрон – единица мутации.
Популярное: Как выбрать специалиста по управлению гостиницей: Понятно, что управление гостиницей невозможно без специальных знаний. Соответственно, важна квалификация... Генезис конфликтологии как науки в древней Греции: Для уяснения предыстории конфликтологии существенное значение имеет обращение к античной... Почему двоичная система счисления так распространена?: Каждая цифра должна быть как-то представлена на физическом носителе... ©2015-2024 megaobuchalka.ru Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. (257)
|
Почему 1285321 студент выбрали МегаОбучалку... Система поиска информации Мобильная версия сайта Удобная навигация Нет шокирующей рекламы |